成果信息
本發(fā)明公開了一種分泌抗人β-actin蛋白單克隆抗體的雜交瘤細胞,通過在大腸桿菌中原核表達人β-actin融合蛋白,以純化的人β-actin蛋白作為抗原免疫BALB/c小鼠。經(jīng)過細胞的融合及篩選獲得能穩(wěn)定分泌抗人β-actin蛋白McAb的雜交瘤細胞,命名為2B4。對McAb的特異性、穩(wěn)定性和適用范圍進行了鑒定,融合蛋白的相對分子質(zhì)量為43kDa,可溶于8M尿素。雜交瘤細胞上清的抗體效價為1×105,腹水的抗體效價為1×107。Westernblot結果顯示,單克隆抗體識別人、鼠、兔和魚的β-actin蛋白,與其發(fā)生特異性反應。)
背景介紹
由于2B4分泌的單克隆抗體可以廣泛的應用于細胞生物學和免疫學試驗,具有良好的應用價值,因此開始了深入研究。)
應用前景
2B4分泌的McAb具有較好的廣譜適用性, 可以廣泛用作人、鼠、兔和魚等基因表達調(diào)控研究的內(nèi)參抗體。雜交瘤細胞系及單抗穩(wěn)定性檢測結果說明,單抗的雜交瘤細胞系和單抗的穩(wěn)定性都是非常好,長期保存不會使抗體效價降低。多項數(shù)據(jù)表明2B4分泌的McAb能廣泛應用于多種生物和組織的細胞生物學和免疫學試驗,具有良好應用前景和以及進行產(chǎn)業(yè)化。)