成果信息
本發(fā)明提供了一種同時檢測乙型肝炎病毒三種核苷酸類似物耐藥位點的方法及其試劑盒,該發(fā)明以乙型肝炎病毒基因型序列為基礎(chǔ),在HBV聚合酶區(qū)域設(shè)計了四條巢式擴增引物和針對十個耐藥位點的二十七條野生、耐藥檢測的寡核苷酸探針,使用地高辛標(biāo)記的寡核苷酸通用引物進行巢式PCR反應(yīng)擴增靶DNA片段,利用被標(biāo)記的靶DNA擴增產(chǎn)物與特異性寡核苷酸探針在基質(zhì)上雜交,通過雜交結(jié)合物偶聯(lián)的酶促顯色反應(yīng),判斷HBV對三種核苷酸類似物耐藥的存在。該方法提高了檢測的準(zhǔn)確性、可靠性、靈敏度,可以同時檢測三種核苷類似物的10個耐藥位點,從而實現(xiàn)了高通量,多位點,經(jīng)濟,快速的檢測,更加貼合臨床需求。對實現(xiàn)早期監(jiān)測,并合理指導(dǎo)臨床個體化用藥有著重要的意義。)
背景介紹
乙型肝炎病毒的感染呈世界范圍廣泛流行,尤其我國感染者占到全球的1/3,慢性感染者中的5%-10%可導(dǎo)致肝癌(HCC),30%進展為肝硬化,而肝硬化患者中的23%會在5年內(nèi)發(fā)生肝功能衰竭,據(jù)統(tǒng)計,我國每年用于HBV感染患者的醫(yī)療和保健費用高達1000億人民幣,因此,HBV感染嚴重危害人民健康,造成國民經(jīng)濟嚴重損失。 )
應(yīng)用前景
該技術(shù)目前被廣泛應(yīng)用于臨床治療,有巨大的社會效益和經(jīng)濟效益,市場應(yīng)用前景較為廣闊。)