成果信息
本發(fā)明提供了一種使用簡單方便，靈敏度和特異性高的熒光定量PCR試劑盒，能夠優(yōu)化提高PCR的擴增效率，降低PCR污染發(fā)生率，準確、快速檢測標本中的BDV核酸，以及本發(fā)明提供的博爾納病病毒p24片段實時熒光定量PCR檢測試劑盒包括：10×逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液、AMV逆轉(zhuǎn)錄酶、2×熒光定量PCR反應(yīng)液、Taq聚合酶、標準品、陰性對照。其中熒光定量PCR反應(yīng)液為經(jīng)過優(yōu)化的反應(yīng)液。能夠縮短反應(yīng)時間和降低PCR污染可能性，還能顯著提高定量的準確性和擴增效率。使用該試劑盒可以對動物樣本進行大規(guī)模篩選，通過流行病調(diào)查來了解該病毒在我國的分布及流行特征，為防治將來可能出現(xiàn)大規(guī)模的暴發(fā)流行提供基礎(chǔ)，此外在臨床檢驗中可以進一步分析 BDV 和人類精神疾病的相關(guān)性。)
背景介紹
博爾納病病毒(BDV)是一種嗜神經(jīng)性的單股負鏈RNA病毒，BDV的感染宿主包括了大部分溫血動物，而根據(jù)一些研究認為BDV感染也可能于人類精神疾病有關(guān)，在我國和其他國家一些地區(qū)動物、精神疾病患者和腦炎患者中均有散在BDV疑似陽性病例報導(dǎo)；BDV基因組含有6個開放式讀碼框(ORF)，其中ORFⅡ編碼磷蛋白(p24)，磷蛋白作為抗原參與血清免疫反應(yīng)可以檢測判斷是否有病毒感染存在，此外p24基因由于序列高度保守，并且在檢測同等病毒量時其敏感性要高于核蛋白基因,故p24片段是在BDV核酸檢測上的主要指標。)
應(yīng)用前景
目前該發(fā)明對臨床病人檢測陽性率為3.6%，對動物檢測陽性率為4.4%，而且該試劑盒敏感性、特異性、重復(fù)性和穩(wěn)定性均佳,是BDV基礎(chǔ)研究、流行病學(xué)調(diào)查、臨床檢測的良好工具，市場應(yīng)用前景較為廣闊。 )
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