成果信息
本發(fā)明是將人β－防御素－2構(gòu)建成植物表達載體質(zhì)粒，再將該載體質(zhì)粒導(dǎo)入植物中，目的之一是在植物體中生產(chǎn)空間結(jié)構(gòu)與天然hBD－2完全一致、抗菌活性高的防御素，然后從轉(zhuǎn)基因植物中提取hBD－2，以降低hBD－2的生產(chǎn)成本；目的之二使植物具有抗細菌、病毒及（或）真菌的特點，從而培育出作物、林木、果蔬以及花卉等植物抗病新品種，為農(nóng)林果木業(yè)生產(chǎn)以及減少農(nóng)藥污染作出貢獻。本發(fā)明的重組人β-防御素-2植物表達載體rp1300-hBD2含有兩個CaMV 35S啟動子，能高效表達目的基因，即高效地在各種類型的植物細胞中啟動基因的表達；載體中含有卡那霉素抗性基因，可對轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌陽性克隆進行篩選；含有潮霉素抗性基因，適于植物轉(zhuǎn)化后用化學(xué)試劑潮霉素進行陽性轉(zhuǎn)化體篩選。由于不含報告基因可表達具有正確空間結(jié)構(gòu)和生物活性的人β防御素-2。將重組人β－防御素－2植物表達載體rp1300-hBD2轉(zhuǎn)入煙草后，經(jīng)PCR、RT-PCR、 Northern-Blot以及Western-Blot檢測證實，人β－防御素－2基因已進入煙草，并能夠正確表達人β防御素-2蛋白；轉(zhuǎn)化煙草葉的上清液對金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌都具有較強的抗菌活性，說明轉(zhuǎn)化煙草不僅能表達人β防御素-2而且還具有較強抗菌生物活性。)
背景介紹
防御素最重要的生物學(xué)活性就是其廣譜高效的抗菌和抗病毒活性，并且未發(fā)現(xiàn)有耐藥菌株產(chǎn)生，從進化角度看，動物應(yīng)用這些分子來對抗微生物感染歷經(jīng)千百萬年仍顯出強大的效力，是一類天然有效的抗感染物資，因此，人們把防御素看作了一個對付細菌耐藥的可能的突破口對其投入了較大的關(guān)注，其中最引人注目的就是β-防御素。)
應(yīng)用前景
本項目培育出作物、林木、果蔬以及花卉等植物抗病新品種，為農(nóng)林果木業(yè)生產(chǎn)以及減少農(nóng)藥污染作出貢獻，可見具有很大的實用性。)
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