成果信息
本項目中,用NaCI溶液從凝膠中回收DNA或RNA方法如下: (1)取一干凈1.5 ml EP離心管,稱取其重量; (2)切取含DNA或RNA條帶的凝膠,放入1.5 ml EP離心管中; (3)再次稱取離心管重量,并計算凝膠重量; (4)盡量倒碎凝膠,以便加入NaCI溶液后DNA或RNA快速從凝膠中析出; (5)加入3-4倍體積(V/W)的0.4 M NaCI溶液; (6)震蕩混勻1分鐘,然后置于4 ℃ 過夜,對DNA或RNA進行洗脫,其間混搖2-3次以促進DNA或RNA析出; (7)吸取上清,加入3-4倍無水乙醇,混勻; (8)置冰上至少2小時或于-20 ℃過夜,以促進DNA或RNA沉淀; (9)4 ℃ 14,000rpm離心15分鐘,以沉淀DNA或RNA; (10)吸去上清,沉淀空氣干燥后加適量TE或水溶解,4 ℃或-20 ℃保存?zhèn)溆谩? (11)上述方法所得DNA的回收率一般在60~80%之間, RNA的回收率一般在90~100%之間(注意:回收RNA時,要使用無RNA酶的試劑和器具),且本技術非常成熟。 )
背景介紹
從瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中回收DNA或RNA是實驗室一種常見操作,目的是分離和純化DNA或RNA片段。目前最常用的是用離心柱分離純化試劑盒進行操作。然而此類試劑盒比較昂貴,一般實驗室無力購買,且操作步驟較為煩瑣,導致不能廣泛應用。因此,急需一種價格低廉,能夠廣泛應用的從瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝中回收DNA或RNA方法。)
應用前景
本項目可用于臨床和基礎各個分子生物實驗室,市場前景廣闊,經濟效益可觀。)